检测猪戊型肝炎病毒的荧光定量PCR方法的建立

根据GenBank中猪戊型肝炎病毒的ORF2核苷酸序列的保守区域设计合成一对特异性引物,建立了一套SYBRGreen Ⅰ荧光定量PCR检测猪源戊型肝炎病毒(swHEV)的方法,并评价了该方法的灵敏度、稳定性和特异性,同时与常规的RT-nPCR进行对比分析.结果表明,建立标准曲线的相关系数为0.998,斜率为-3.039,Ct值变异系数(CV)在0.17％～1.41％之间,有良好的稳定性.同时在检测猪群常见病中显示出很好的特异性,并且比RT-nPCR更灵敏,适合于swHEV的检测.     

莱姆病螺旋体感染对蜱的4个功能基因的转录影响

为探索蜱及蜱传病的防控新策略,了解病原与媒介硬蜱相互作用的分子机制,本研究以莱姆病病原伯氏疏螺旋体感染后对长角血蜱4个功能基因的转录影响进行了研究。将不同浓度梯度的伯氏疏螺旋体显微注射到长角血蜱体内,分不同的时间段提取蜱的总RNA,反转录成cDNA后,用实时荧光定量PCR检测蜱基因的表达水平。结果显示:伯氏疏螺旋体感染对蜱半胱氨酸蛋白酶抑制剂1(HLcyst-1)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(HLcyst-3)、卵泡抑素(FRP)、凝血酶抑制剂(Hemalin)4个功能基因的转录均产生了显著影响,但存在时间和剂量相关性,感染后第4天显著诱导了长角血蜱HLcyst-1基因的表达,抑制了Hemalin基因表达。     

茄子单性结实候选基因的表达分析

对茄子单性结实抑制差减文库中的1 248个差异表达unigenes在GeneBank数据库中进行BLAST比对分析,结果表明1 109个unigenes具有同源序列,其编码的蛋白包括甲硫氨酸亚砜还原酶、MADS-box转录因子、组蛋白和隐花色素等,涉及到果实发育的多个方面,139个unigenes没有同源序列,可能为新基因。利用荧光定量PCR研究10个差异表达unigenes在茄子单性结实果实和非单性结实果实发育过程中的表达模式,分析表明,在低温条件下,unigenes Z569和Z707在单性结实果实发育中特异表达,可能与单性结实果实的形成有关,可作为研究单性结实的候选基因。     

不同杏品种的多个数量性状的分析和综合评价

对48个不同杏品种的干径、二次分枝数、南北冠幅、叶面积、单果重、叶柄长、核重、仁重、壳厚、果实体积等10个数量性状进行主成分分析,从而得出5个主成分。结果表明:果实生长指标、营养生长指标、二次分枝指标、冠幅指标等的累积方差贡献率可达到87%以上,可以反映10个相关性状的主要信息,并根据综合主成分值为48个杏品种排名,排名结果与实际的表现相一致。根据计算出的主成分值,48个杏品种可聚为四大类:营养生长水平中等、果大小中等类型;营养生长水平高、无果或小果类型;果大、营养生长水平良好类型;营养生长水平良好、果大小中等类型。     

基于生态修复理念的西汉帝陵大遗址生态景观规划设计研究

通过分析挖掘西汉五陵塬地区的历史、民俗文化,以恢复生态学理论为指导,总结出西汉帝陵大遗址区生态景观设计原则,探讨了如何在城郊大遗址保护中运用生态设计手法创造出具有生态效应和持久魅力的遗址区景观规划设计案例。     

豚草发生地土壤微生物的数量特征

豚草是世界性的恶性害草,造成巨大的农牧业损失和景观破坏.该文研究了豚草发生地土壤微生物的数量特征.结果表明:土壤微生物总数的峰值出现在8月,放线菌、细菌和真菌的数量峰值分别出现在7～9月.在8月和9月,豚草样地的土壤细菌、真菌和放线菌数量均低于对照样地,说明豚草对土壤微生物数量具有一定的抑制作用.三裂叶豚草对土壤微生物数量的抑制作用大于普通豚草.豚草的抑菌效应可为新药源、绿色农药等的开发提供参考.     

Effect of hot air,UV-C,white light and modified atmosphere treatments on expression of chlorophyll degrading genes in postharvest broccoli (Brassica oleracea L.) florets

Several treatments were applied in order to delay postharvest degreening in broccoli florets and investigate their effects on genes associated with chlorophyll catabolism. Degradation of chlorophylls is the most evident visual manifestation of broccoli postharvest deterioration, occurring rapidly due to the immature stage in which the material is harvested. Treatments such as storage in modified atmosphere, exposure to hot air, UV-C and white lamps were employed in the current work to induce a delay in degreening and chlorophyll degradation. Expression of genes possibly related to chlorophyll catabolism was analyzed in these samples and discussed. Chlorophyllases, the enzymes traditionally believed to remove the phytol side chain from chlorophyll appear to have a gene expression that was not regulated by postharvest treatments. Pheophytinase, a recently discovered new enzyme in this metabolic pathway, correlated chlorophyll loss accurately in heat, UV-C and white-light treatments, but not in modified atmospheres. Results presented in this work indicate that postharvest treatments that delay chlorophyll degradation have a higher effect on the expression of pheophytinase rather than on chlorophyllase genes.     

甜瓜结实花初花节位QTL分析

 以WI998为母本（纯雌株、厚皮网纹甜瓜品系）,TopMark为父本（雄全同株纯合品系）,配置杂交组合,利用单粒传得到171个株系的重组自交系（F₂S₄）群体构建甜瓜SSR分子标记遗传连锁图谱。该连锁图谱包含19个连锁群,覆盖基因组长度为1 414.2 cM,标记间平均距离为10.2 cM。对结实花初花节位开展QTL分析,共检测到9个QTL,分别分布在第1、9、10、11连锁群上,各QTL的LOD值在2.89 ~ 9.42之间,4个QTL贡献率超过10%。位于第9连锁群的QTL Fp9.4贡献率最大,为18.57%（2010秋季LOD = 9.17）;位于第9连锁群的Fp9.3（2010春季8.64%,LOD = 6.44;2010秋季17.99%,LOD = 9.42）,位于第10连锁群的Fp10.1（2010春季3.59%,LOD = 2.89;2010秋季6.20%,LOD = 3.43）在两季的位置都很稳定。获得与结实花初花节位紧密连锁（< 10 cM）的8个特异标记（SSR01737、MU141991、TJ105、GCM206、SSR04910、MU173563、NR52、MU146331）,为进一步开展QTL精细定位提供参考。     

板栗赤霉素缺陷型短雄花序芽变的初步鉴定及CmGID1基因的表达分析

 利用赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯利和吲哚乙酸分别涂抹板栗短雄花序,结果显示仅赤霉素能够抑制短雄花序顶端的细胞程序性死亡,并在一定程度上恢复短雄花序的伸长生长。通过RT-PCR扩增方法,从板栗短雄花序芽变和正常雄花序cDNA中克隆出赤霉素受体基因GID1部分序列。测序及序列分析结果表明：克隆的cDNA片段为786 bp,所推导的氨基酸序列与杨毛果GID1氨基酸序列有91%的同源性,与陆地棉、蓖麻GID1均有85%的氨基酸序列同源性。经氨基酸序列功能分析,推测该GID1序列是板栗有编码功能的赤霉素受体基因,命名为CmGID1（GenBank登录号为HQ651231）。实时荧光定量PCR结果显示,从花序萌发至花药萌发前期,除其中一个时期（5月23日）外,芽变短雄花序CmGID1的表达量均高于正常雄花序;在花序的快速生长期,芽变短雄花序CmGID1表达量显著高于正常雄花序（P < 0.01）;且赤霉素处理后恢复生长的短雄花序CmGID1表达量显著降低（P < 0.01）。综合试验结果,初步揭示了该短雄花序为一个赤霉素缺陷型突变体。     

猕猴桃GalUR表达与抗坏血酸积累的关系

 通过RT-PCR从美味猕猴桃（Actinidia deliciosa）果实中克隆了D–半乳糖醛酸还原酶（GalUR）全长 cDNA序列,并分析其序列特征,进行原核表达,制备特异抗体,分析其mRNA及蛋白表达水平与果实发育过程及不同组织中抗坏血酸（AsA）合成和积累的关系。结果表明：克隆的GalUR cDNA（GenBank登录号为GU339035）包含的最大开放阅读框（open reading frame,ORF）为990 bp,编码329个氨基酸残基,预测分子量为37 kD,与报道的草莓等其他植物GalUR具有较高的相似性。构建的pET-32a（＋）-GalUR载体在大肠杆菌BL21（E. coli BL21）中异源表达后,获得了主要以包涵体存在约58 kD的融合蛋白GalUR-His（His约21 kD）。以该蛋白制备抗体,与重组蛋白的Western杂交表明该抗体能与GalUR蛋白发生特异反应。对猕猴桃可溶性蛋白杂交显示,猕猴桃体内GalUR蛋白的分子量约37 kD。在猕猴桃不同组织和发育过程中,GalUR表达水平与AsA含量表现为高度一致,但前体饲喂发现,与L–半乳糖相比,D–半乳糖醛酸并不能有效促进猕猴桃AsA的合成。这些结果表明以单体形式存在的GalUR与猕猴桃AsA合成有着密切关系,但它可能并不是猕猴桃AsA积累的主要调控环节。